城市自来水一般经过沉淀、过滤及消毒等处理,含有的微生物较少,但当处理工艺不合理或者处理过程中造成污染等都会导致生活用水的二次污染,因此,加强生活饮用水的日常检测十分必要。微生物检测是生活污水监测中的重要内容。
根据《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)中的水质常规指标,微生物指标中一般检测总大肠菌群和细菌总数两项指标,当检出总大肠菌群时,需进一步检测耐热大肠菌群和大肠埃希氏菌。
总大肠菌群的检测步骤:
生活饮用水:以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样,注入灭菌平皿中,总大肠菌群指一群在37℃温度下培养24h能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。
总大肠菌群代表了一大群有共同性质的革兰氏阴性、杆状细菌。这个菌群包括耐热大肠杆菌和以粪便为来源的细菌,也包括一些来自环境本身的细菌。
因此总大肠菌群的存在可能不指示粪便污染。在极端的情况下,有高数量的总大肠菌群可能同时有低数量甚至零的耐热大肠杆菌。这样的结果并不一定代表粪便污染的存在。有可能是因为进入水体的土壤或者有机物或者在一定的条件下适合其他种类的大肠细菌的生长。总的来说,总大肠菌群在 35°C 或者 37°C 的温度下,含有乳酸的培养基里面或者上面生长。
总大肠菌群滤膜法是指用孔径为0.45um的微孔滤膜过滤水样,将滤膜贴在添加乳糖的选择隆培养基上在37℃条件下培养24h,能形成特征性菌落的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌以检测水中总大肠菌群的方法。
1、培养基与试剂
总大肠菌群无色培养基是我公司改良的培养基,用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品中大肠菌群的快速检测。
2、培养基的制备
取一管总大肠菌群培养基,溶于另50ml无菌蒸馏水,加热溶解,煮沸1min,在实验室条件下可121℃高压灭菌15分钟。使用时加3mL~5mL于灭菌吸收垫上,以刚浸没吸收垫为准,再将滤膜置于培养垫上培养。
3、水样过滤
撕开灭菌滤膜的包装袋,用无菌镊子(火焰灭菌器灭菌)夹取灭菌滤膜边缘部分,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤头(火焰灭菌器灭菌)上,固定好过滤杯,将100mL水样(如水样含菌数较多,可减少过滤水样量,或将水样稀释)注入过滤杯中,接上12V电池,抽滤。
4、培养
水样过滤完后,再抽气约5s,取下过滤杯,用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分。移放在总大肠菌群培养基上,滤膜截留细菌面向上,滤膜应与培养基完全贴紧,两者间不得留有气泡,然后将平皿盖好,放入37℃ 恒温箱内培养24h士2h。
5、结果观察与报告
将培养后的平板取出观察,大肠菌群菌落在无色培养基上为白色,如上图。
计数培养基上大肠菌群菌落数,水中大肠菌群数以100ml水样中大肠菌群菌落形成单位(CFU)表示,公式如下:
总大肠菌群菌落数(CFU/100ml)=数出的总大肠菌群数*100/过滤的水样体积(ml)
大肠杆菌|微生物|总大肠菌群检测仪产品链接:http://www.qingdaohaijing.com/szcgjcy/217.html
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